实 验 目 的
实 验 原 理
细胞吞噬作用原来是单体细胞动物摄取营养物质的方式，也是原始防御作用。随着动物界的进化，在高等动物中，则发展生成大小两类吞噬细胞（即巨噬细胞和嗜中性粒细胞），专司吞噬作用，成为非特异免疫功能的重要组成部分。
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成，然后进入血液到达各组织内，并进一步分化为各种巨噬细胞。当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动，主动向病原体或异物移行，在接触到病原体或异物时，即伸出伪足将之包围并内吞入细胞，形成吞嗜体，继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体，通过其中水解酶作用下，将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化的残渣排除细胞外。
实 验 用 品
一、器材
显微镜，解剖盘，剪刀，镊子，载玻片，盖玻片，注射器，吸管，吸水纸
二、试剂
1、0.85%生理盐水（0.85g氯化钠溶于100ml蒸馏水中）
2、alsever溶液
葡萄糖 2.05g
柠檬酸钠 0.89g
柠檬酸 0.05g
氯化钠 0.42g
蒸馏水 100ml
调ph至7.2，过滤灭菌或高压灭菌10分钟，置4摄氏度冰箱保存
0.4%台盼蓝染液（台盼蓝染粉 0.4g，0.85%生理盐水）
4.0%淀粉肉汤（含台盼蓝染液）
牛肉膏 0.3g
蛋白胨 1.0g
氯化钠 0.5g
蒸馏水 100ml
加热后加入可溶性淀粉6.0g，促使溶解，再煮沸灭菌，置4摄氏度冰箱保存。用时水浴融化，加入适量台盼蓝染液混匀，使呈蓝色。
三、 材料
1、 小白鼠
2、 1%鸡红细胞悬液。
自健康鸡翼静脉采学1ml，放入盛有4ml alsever溶液瓶中，混匀置4摄氏度冰箱保存备用。使用前加入0.85%生理盐水离心（1500r/min 10min）洗涤两次，再用生理盐水配成1%浓度悬液。
实 验 方 法
一、在实验前一天，给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。注射时，先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，用左手的拇指食指抓住小鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手的无名指和小指按住尾与后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部后1/2处的一侧注射，进针勿过深，否则易损害肝及血管等，造成出血致死。
二、实验时，每组去一只注射过淀粉肉汤的小白鼠，腹腔注射1%鸡红细胞悬液1ml，轻按小白鼠腹部，使悬液分散。
三、20min后，用颈椎脱臼法处死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时向下按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致使鼠死亡）
四、将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。
五、每人取一张干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。
实 验 结 果
调节集光气使显微镜视野中光线稍暗些。在高倍镜下，先分辨清鸡红细胞和巨噬细胞。鸡红细胞是一些淡黄色、椭圆形有核的细胞；而数量较多，较大的圆形形或不规则的细胞，其表面具有许多似刺毛状的小突起（伪足），胞质中含有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝的淀粉肉汤形成的巨噬体），即为巨噬细胞。慢慢移动玻片标本，仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见的鸡红细胞（1~多个）紧缚于巨噬细胞表面；有的巨噬细胞已经将1~数个红细胞部分吞入；有的巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚形成椭圆形的吞噬体；有的巨噬细胞内的吞噬泡体积缩小，并呈圆形，这是已经与初级溶酶体发生融合，泡内物正在被消化分解，将直接所观察到的处在不同吞噬阶段的巨噬细胞形态，动态的连贯起来，想一想吞噬作用的全过程。
作 业
在高倍镜下绘出在不同吞噬阶段的巨噬细胞图各一个（如鸡红细胞附于巨噬细胞表面、部分吞入红细胞、吞入后形成吞噬体和吞噬体已开始被消化分解等），示吞噬作用的过程。
思考题
一、 实验前一天，给小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤的目的是什么？
二、 巨噬细胞内有哪几种结构对执行复杂的吞噬功能最为重要？
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