DNA的Feulgen染色法
学习DNA的Feulgen染色法，观察染色结果，了解反应原理。
实验原理
DNA经弱酸（1mol/L HCl）水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，形成紫红色的化合醌基，醌基是一个发色基团，所以具有颜色。对照组预先用热三氯醋酸或DNA酶处理，抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应，从而证明了Feulegn反应的专一性。
实验用品
一、 材料
1. Carnoy液固定的鼠肝石蜡切片
2. Carnoy液固定的洋葱根尖或蚕豆根尖切片
二、试剂
1. Carnoy固定液
3份95%酒精加入一份冰醋酸。
2.1mol/L HCl
取比重1.18的浓HCl82.5ml，加水100ml。
3. Schiff 试剂
先将200ml蒸馏水煮沸，由火上取下，加入碱性品红1克，充分搅拌，有助于溶解。待溶液冷到50oC时，过滤到磨口棕色试剂瓶中。加入1mol/L HCl 20ml，冷却到25oC时加入1g偏亚硫酸钾(K2S2O5)或偏亚硫酸钠（Na2S2O5）充分振荡后盖紧瓶塞，放于暗处过夜。次日取出，呈淡黄色或近于无色，加中性活性炭一匙，约0.5克，剧烈振荡1min，过滤后既得无色品红。
无色品红配成后塞紧瓶塞。外包黑布或黑纸，贮藏在冰箱或黑暗低温处。
4. 亚硫酸水溶液（漂白液）
10%偏重偏亚硫酸钠水溶液5ml，蒸馏水100 ml，1mol/L HCl 5ml，摇匀，塞紧瓶塞。此溶液在使用前配制，否则会因SO2逸出而失效。
5. 5%三氯醋酸
6. 0.5%固绿酒精溶液(95%酒精溶液)
石蜡切片
↓
溶蜡二甲苯Ⅰ （3～5min）
↓
溶蜡二甲苯Ⅱ （3～5min）
↓
1/2纯酒精加1/2二甲苯 （3～5min）
↓
纯酒精Ⅰ （2～3min）
↓
纯酒精Ⅱ （2～3min）
↓
95%酒精 （2～3min）
↓
83%酒精 （2～3min）
↓
70%酒精 （2～3min）
↓ 对照组
蒸馏水 5%三氯醋酸，90oC，15min
实 ↓
验 70%酒精（2～3min）
组 ↓
1mol/L HCl 蒸馏水（过一下）
↓
1mol/L HCl 60oC, 8～15min(水浴或温箱中)
↓
Schiff 试剂, （60～90min）
↓
亚硫酸水(ⅠⅡⅢ) (各1min)
↓
流水冲洗 （5～15min）
↓
蒸馏水
↓
0.5%固绿酒精溶液（复染） (1min) (此步要快，以免过染)
↓
蒸馏水
↓
70%酒精
↓
83%酒精
↓
95%酒精
↓
纯酒精Ⅰ
↓
纯酒精Ⅱ
↓
透明二甲苯Ⅰ
↓
透明二甲苯Ⅱ
↓
封片
（贴上标签，注明材料，反应名称，作者姓名及日期）
显微镜下检查
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