实验二 细胞凝集反应
实验原理
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化 ,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
实验用品
1. 土豆块茎。
2. 显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。
3.PBS缓冲液
称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 0.43g、加蒸馏水,定容至1000ml,调PH值到7.2.
4.2%的红细胞
以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),用生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。
实验方法
1. 称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
2. 用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴,置载玻片上,充分混匀,精致20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。
3. 以PBS液加2%血细胞液作对照试验。
作业
简图表示血细胞凝集原理
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